注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:四輻射鳥圓線蟲PCR檢測試劑盒哪家代理
英文名稱:Ornithostrongylus quadriradiatusPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
四輻射鳥圓線蟲PCR檢測試劑盒哪家代理原理是由一對引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
四水磷肌二鈉鹽其他名稱: 四水磷肌鈉鹽;四水肌磷鈉鹽;四水磷肌肉素二鈉英文名稱: Sodium creatine phosphate dibasic tetrahydrate其他名稱: Creatine phosphate disodium salt tetrahydrate產(chǎn)品規(guī)格: 高純,98%包裝:5克/25克CAS號:71519-72-7
脫氧膽鈉250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1公斤,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,中文名稱: 脫氧膽鈉其他名稱: 去氧膽鈉英文名稱: Sodium deoxycholate其他英文名稱: Deoxycholic acid sodium salt;3α,12α -Dihydroxy-5β-cholanic acid sodium salt;Sodium 3,12-dihydroxycholanate
膽鈉(豬)中文名稱: 膽鈉(豬)其他名稱: 豬膽鈉;(3α,5β, 7α,12α)-3,7,12-三羥基膽(甾)-24-單鈉鹽;水合膽鈉英文名稱: Sodium cholate其他名稱: Cholic acid sodium salt;3α,7α,12α-Trihydroxy-5β-cholanic acid sodium salt產(chǎn)品規(guī)格: BR,99%包裝:25克/100克/1公斤
牛膽鈉中文名稱: 牛膽鈉其他名稱: 牛膽鈉;牛膽鈉鹽英文名稱: Sodium taurocholate其他名稱: Taurocholic acid sodium salt;Sodium Taurocholate;Taurocholic acid, sodium salt;2-[(3a,7a,12a-Trihydroxy-24-oxo-5b-cholan-24-yl)amino]ethanesulfonic acid;3α,7α,12α-Trihydroxy-5β-cholan-24-oic acid N-(2-sulfoethyl)amide產(chǎn)品規(guī)格: BR,97%包裝:25克/100克/1公斤
2,6-二靛酚英文名稱: DPIP其他名稱: DCIP;2,6-Dichloroindophenol產(chǎn)品規(guī)格: 高純,97%包裝:5克CAS號:956-48-9C12H7Cl2NO2·xH2O=267.09
2,6-二靛酚鈉鹽其他名稱: 2,6-二吲哚酚鈉鹽;2,6-二酚靛酚鹽;二酚靛酚鈉;2,6-二酚靛鈉;2,6-二酚靛酚鈉鹽;二藍(lán)靛酚鈉;雙酚靛酚鈉;2,6-雙靛酚鈉鹽英文名稱: DPIP其他名稱: DCIP;2,6-Dichlorophenolindophenolsodium salt;2,6-Dichloro-N-(4-hydroxyphenyl)-1,4-benzoquinoneimine sodium salt; 2,6-Dichlorobenzenone-indophenol sodium salt;2,6-Dichlorophenolindophenol sodium salt hydrate產(chǎn)品規(guī)格: 高純,97%包裝:1克/5克/25克/100克CAS號:620-45-1
丁鈉其他名稱: 正丁鈉英文名稱: Sodium butyrate其他名稱: Sodium n-butyrate;Sodium butanoate;Butyric acid sodium salt產(chǎn)品規(guī)格: 試劑級,98%包裝:25克/100克/500克CAS號:156-54-7
植鈉其他名稱: 肌醇六磷鈉;六磷環(huán)己六醇鈉鹽;環(huán)己六醇六磷鈉鹽英文名稱: Phytic acid sodium salt hydrate其他名稱: Inositol hexaphosphoric acid sodium salt;Sodium phytate產(chǎn)品規(guī)格: 高純,98%包裝:100克/500克CAS號:14306-25-3
四輻射鳥圓線蟲PCR檢測試劑盒哪家代理D(+)-10-Camphorsulfonyl chloride 質(zhì)量規(guī)格:檢查
GLYCODEOXYCHOLIC ACID SODIUM SALT 質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用
5-METHYL-2,3-HEXANEDIONE 質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法含量測定用
(R)-3-(3-Methylbutanoyl)-4-benzyloxazolidin-2-one 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
1-Hydroxy-2-naphthoic acid 質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法含量測定用
5,5-DIMETHYL-1-PYRROLINE N-OXIDE 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
NA 質(zhì)量規(guī)格:HPLC含量測定
4-(Trimethylsilyl)-3-butyn-2-one 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
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